細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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VERO；非洲綠猴腎細(xì)胞 |
貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86446 |
細(xì)胞名稱(chēng) 非洲綠猴腎細(xì)胞；VERO
形態(tài)特性 上皮樣，多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 Vero細(xì)胞株是日本千葉大學(xué)的Yasumura Y和Kawakita Y從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細(xì)胞常作為轉(zhuǎn)染宿主，用于支原體的檢測(cè)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Dimethylolurea 中文名：雙羥甲脲 分子式：C3H8N2O3 度：98.0% 小鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒
4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式：C28H18N2O2 度：98.0% 小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene 中文名：1,4-雙(2-苯并惡唑基)萘 分子式：C24H14N2O2 度：98.0% 小鼠白介素35（IL-35）ELISA試劑盒
4,4'-Diaminodiphenylsulfone 中文名：4,4'-二氨基二苯砜 分子式：C12H12N2O2S 度：98.0% 小鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒
9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene 中文名：9,9-雙(4-羥苯基)芴 分子式：C25H18O2 度：98.0% 小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒硫酸鋰一水(分子生物學(xué)級(jí)) Lithium sulfate monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí) Rat thyroxine (T4) ELISA Kit 大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
L-蘇糖酸鈣(>99%,BR)
L-Threonic acid calcium salt 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR HumanChromogranin,CgAELISAKit 人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
L-酪氨酸二鈉鹽(>98%,BC)
L-Tyrosine di salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISA試劑盒人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
魯米諾鈉(>98%,BS) Luminol,
salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BS 格蘭-韋革氏(Gram-Weige)染色試劑盒50
-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)
Magenta-Gal 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)
Magenta-Gal 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠腦啡肽原B(PDYN)ELISA試劑盒 ，英文名： PDYN ELISA Kit
檸檬酸鎂九水(>98%,BR) Magnesium
nonahydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA檢測(cè)試劑盒RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit
96T/48T
十二烷基硫酸鎂(分子生物學(xué)) Magnesium dodecyl sulfate 質(zhì)量規(guī)格：>85%,分子生物學(xué)級(jí) 人多萜長(zhǎng)醇二0酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶(DDOST/OST-48)試劑盒 Human DDOST ELISA Kit
氟化鎂(>98%,BR) Magnesium fluoride 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
Ratmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
氫氧化鎂(>99%,BR) Magnesium hydroxide 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
DMEM培養(yǎng)基1/10升(片劑)柯里拉京（標(biāo)準(zhǔn)品）
Corilagin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗**/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒 ，英文名： ADH/VP/AVP ELISA Kit
人參皂苷F3（標(biāo)準(zhǔn)品） Ginsenoside F3 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗繆勒管(AMH)ELISA試劑盒 ，英文名： AMH ELISA Kit
槐定堿（標(biāo)準(zhǔn)品） Sophoridine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥96.50%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELIS
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
VERO；非洲綠猴腎細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。