細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 非洲綠猴腎細(xì)胞；VERO E6
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞為VERO 76的克隆，對(duì)胡寧病毒，馬丘波、拉沙等病毒敏感。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:4，每周換液2-3次
傳代情況 P25
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
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產(chǎn)品名稱 |
VERO E6；非洲綠猴腎細(xì)胞 |
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生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
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貨號(hào) |
BJ-01X86434 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Benzalazine 中文名：二芐肼 分子式：C14H12N2 度：98.0% 小鼠白介素1(IL-1)ELISAKit
Benzofuroxan 中文名：苯并呋咱 分子式：C6H4N2O2 度：98.0% 小鼠白介素1β(IL-1β)ELISAKit
(2-Benzothiazolylthio)acetic
acid 中文名：2-(苯并噻唑基硫代)乙酸 分子式：C9H7NO2S2 度：98.0% 小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISAKit
Anthraquinone-1,5-disulfonic
acid di salt 中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽 分子式：C14H6Na2O8S2 度：98.0% 小鼠血栓素B2(TXB2)ELISAKit
2-(Morpholinodithio)benzothiazole 中文名：2-(4-嗎啉基二硫代)苯并噻唑 分子式：C11H12N2OS3 度：98.0% 小鼠白介素 -5 (mouse IL-5) 作用：
ELISA 規(guī)格： 96T 美國(guó) Biosource橙黃Ⅰ OrangeⅠ 質(zhì)量規(guī)格：IND 大鼠C肽(C-Peptide)ELISA檢測(cè)試劑盒RatC-PeptideELISAKit 96T/48T
藍(lán)VF
Patent Blue VF 質(zhì)量規(guī)格：Indicator 人多巴胺脫羧酶(DDC)試劑盒 Human dopamine decarboxylase,DDC ELISA Kit
酚酞(IND)
Phenolphthalein 質(zhì)量規(guī)格：IND
Ratmaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
化鉀溶液(100g/L)
Potassium iodide solution 質(zhì)量規(guī)格：100g/L DNA產(chǎn)物0酸化處理試劑盒10
化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N)) Potassium iodide solution 質(zhì)量規(guī)格：1/60mol/L(0.1N)
MousePhospholipidaseA2,PL-A2ELISA試劑盒小鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
玫紅酸(AR)
Rosolic acid 質(zhì)量規(guī)格：AR 小鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管(AMH)ELISA試劑盒 ，英文名： AMH ELISA Kit
玫紅酸(指示劑級(jí)) Rosolic acid 質(zhì)量規(guī)格：指示劑級(jí) 大鼠胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒RatInsulin,INSELISAKit
96T/48T
草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
oxalate solution for volumetric analysis 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.96% 人多巴胺-β羥化酶(DBH)試劑盒 Human dopamine-β-hydroxylase,DBH ELISA Kit
百里香酚藍(lán)(IND)
Thymolblue 質(zhì)量規(guī)格：IND
Ratmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
百里香酚藍(lán)(ACS reagent,95 %) Thymolblue 質(zhì)量規(guī)格：ACS reagent,95 % DNA產(chǎn)物去鐵化試劑盒20聚蔗糖70
Ficol 70 質(zhì)量規(guī)格：BR 鈣交換體(NCX)蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
碳酸胍(>98%,BR) Guanidine carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 鈣交換體(NCX)蛋白共沉淀分析試劑盒5
鹽酸肼(>98%,BR) Hydrazine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 鈣交換體NCX蛋白表達(dá)檢測(cè)試劑盒20
水合硫酸鐵(> 99%,BR) Iron(III) sulfate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格：> 99%,BR 鈣離子膜通道二氫受體(DHPR)
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
VERO E6；非洲綠猴腎細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。