細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 豬腎細(xì)胞；LLC-PK1
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源自3~4周齡的Hampshire豬腎組織，可產(chǎn)生纖溶酶原激活物。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle＇s Balanced Salts Solution (EBSS) 3%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代；2~3天1次。
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
LLC-PK1；豬腎細(xì)胞 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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貨號 |
BJ-01X86382 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Desloratadine 中文名：脫羧氯雷他定 分子式：C19H19ClN2 度：98.0% 小鼠 IgG(mouse
IgG) 作用： ELISA 規(guī)格：
96T 美國 ADI
5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole 中文名： 分子式：C7H9N3O3 度：98.0% 小鼠類胰島素樣生長因子 -1 (mouse IGF-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 中文名： 分子式：C5H9N3O 度：98.0% 小鼠 IGF-II
(Mouse IGF-II) ELISA Kit 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
Imidazo[1,2-b]pyridazine 中文名： 分子式：C6H5N3 度：98.0% 小鼠白介素 -1 a
(mouse IL-1 a ) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 奧地利 Bender
Fenazox 中文名：氨芬酸鈉 分子式：C15H14NNaO4 度：98.0% 小量DNA產(chǎn)物化試劑盒 Small DNA
product purification kit苯硫醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC）) Diphenyl sulfide 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC） Mouseserine/threonineproteinkinase,STKELISA試劑盒小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4,4'-二氨基二苯醚(ODA)(標(biāo)準(zhǔn)品)
4,4′-Diaminodiphenyl ether 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠蘭尼定受體1(RYR1)ELISA試劑盒 ，英文名： RYR1 ELISA Kit
二十二烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Docosane 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 人前膠原C端肽酶(PCP)ELISA檢測試劑盒HumanprocollagenCpeptidase,PCPELISAKit 96T/48T
4,4'-二氨基二苯硫醚(標(biāo)準(zhǔn)品)
4,4'-Thiodianiline 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)試劑盒 Rat
Platelet membrane glycoprotein IIb,GPIIb ELISA Kit
丙位十二內(nèi)酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)) γ-Dodecalactone 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC) 英文名稱RatansferrieceptorELISAKit大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)規(guī)格：96T/48T
精噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenoxaprop-P 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 鈣交換體(NCX)蛋白共沉淀分析試劑盒5
6-羥基煙酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)) 6-Hydroxynicotinic Acid 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC) ELISAKitPS-2人早老素2規(guī)格：48T/96T
正庚醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%（GC)) 1-Heptanol 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%（GC) 小鼠賴酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)ELISA試劑盒 ，英文名： LOXL2 ELISA Kit
茚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,>99.0%(GC))
Indene 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,>99.0%(GC) 人黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)ELISA檢測試劑盒Humanmelanoma-associatedaigen,MAGEELISAKit
96T/48T
二十烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Eicosane 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)試劑盒 Rat
Platelet membrane glycoprotein Ib,GPIb ELISA Kit磺胺（標(biāo)準(zhǔn)品） Sulfanilamide 質(zhì)量規(guī)格：熔點(diǎn)測定 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒 ，英文名： sMHC-2 ELISA Kit
磺胺二甲嘧啶
Sulfamethazine 質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR 小鼠可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)ELISA試劑盒 ，英文名： sLOX-1 ELISA Kit
磺胺二甲嘧啶 （標(biāo)準(zhǔn)品） Sulfamethazine 質(zhì)量規(guī)格：≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA檢測試劑盒Mous
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
LLC-PK1；豬腎細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。