細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱(chēng) 盤(pán)羊皮膚細(xì)胞；ASHS3
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雌性盤(pán)羊的耳組織。1997年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle＇s Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS
傳代方法 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
ASHS3；盤(pán)羊皮膚細(xì)胞 |
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生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
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貨號(hào) |
BJ-01X86359 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Drospirenone 中文名：屈螺酮 分子式：C24H30O3 度：98.0% 無(wú)水碳酸鈣 100g
Lynestrenol 中文名：利奈孕醇 分子式：C20H28O 度：98.0% Calciumte,Anhydrous 500g
Norethindrone 中文名：炔諾酮 分子式：C20H26O2 度：98.0% 化鈣 100g
Allylestrenol 中文名：烯丙雌醇 分子式：C21H32O 度：98.0% CalciumChloride,Dihydrate 500g
Estradiol-3-benzoate-17-butyrate 中文名：雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯 分子式：C29H34O4 度：98.0% 無(wú)內(nèi)質(zhì)粒大量提取試劑盒 5T2,4,6-三(五氟乙基)-1,3,5-三嗪(>95.0%(GC)) 2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 96T/48T
2,4,6-三(七氟丙基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 人蛋白酶3(PR3)試劑盒 Human
PR3 ELISA Kit
α-巰基甘油(>98.0%(GC)(T)) α-Thioglycerol 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)
Ratp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit大鼠P53(P53)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
3,5-二甲氧基-4-羥基肉桂酸(>99.0%(GC)(T)) 3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)(T)
GMEM培養(yǎng)基1/10升(片劑)
4'-羥基偶氮苯-2-羧酸(>98.0%(HPLC)(T)) 4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISA試劑盒小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4'-羥基苯偶氮基-4-羧酸水合物(>98.0%(HPLC)(T)) 4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid
Hydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 小鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒 ，英文名： sTLR2 ELISA Kit
羧基甲氧基胺半鹽酸鹽(>98.0%(T)) Carboxymethoxylamine Hemi 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 大鼠維生素A(VA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatVitaminA,VAELISAKit
96T/48T
吉拉德試劑 P(>95.0%(T)) Girard's Reagent P 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T) 人蛋酸酶2(2A),催化亞基,β亞型(PPP2CB)試劑盒 Human PPP2CB ELISA kit
4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量：23.50-24.30 %)
4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione 質(zhì)量規(guī)格：含氮量：23.50-24.30 % RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit大鼠甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
N-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T)) N-tert-Butyl-α-phenylnitrone 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
GMS10電擊感受態(tài)轉(zhuǎn)化試劑盒10胡椒堿 HPLC≥99% 20mg ELISAKitAQP-0人水通道蛋白0規(guī)格：48T/96T
胡蘿卜苷 HPLC≥98% 20mg
ELISAKitAQP-1人水通道蛋白1規(guī)格：48T/96T
胡麻屬苷 HPLC≥98% 20mg
ELISAKitAQP-2人水通道蛋白2規(guī)格：48T/96T
胡桃醌 HPLC≥98% 20mg
ELISAKitAQP-3人水通道蛋白3規(guī)格：48T/96T
湖貝甲素 HPLC≥95% 20mg
ELISAKitAQP-4人水通道蛋白4規(guī)格：48T/96T
葫蘆巴堿 HP
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4ASHS3；盤(pán)羊皮膚細(xì)胞.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。