细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
商品属性：
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产品名称 |
生长特性 |
货号 |
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D6D；杂交瘤细胞 |
半贴壁生长 |
BJ-01X85808 |
细胞名称 杂交瘤细胞；D6D
形态特性 母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
细胞STR鉴定服务流程：
A875细胞，色素瘤细胞 阪崎肠杆菌 红系白血病细胞;TF-12,4-十五二炔酸(>97.0%(T))2,4-Pentadecadiynoic
Acid质量规格：>97.0%(T)
ANGPTL7 Protein
Canine 重组狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 标签)10,12-二十三联炔酸(>98.0%(GC)(T))10,12-Tricosadiynoic
Acid质量规格：>98.0%(GC)(T)
KB(口腔表皮样癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 细胞裂解液 (阳性对照) 1,6-二1酸果糖三钠盐(98-101.0%，BR)Fructose 1,6-bisphosphate, 3 salt质量规格：98-101.0%，BR
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A1,6-二1酸果糖三钠盐(98-101.0%，BR)Fructose
1,6-bisphosphate,3 salt质量规格：98-101.0%，BR
CLEC4A2 Others Rat 大鼠 CLEC4A2 / DCIR 细胞裂解液 (阳性对照) 1酸铵(>99%，BR)L-Ammonium tartrate质量规格：>99%，BR****(标准品)
Etomidate 质量规格：>98%,标准品 Ratierferon-inducibleprotein10,IP-10ELISAKit大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒规格：96T/48T
N-乙酰神经氨酸/唾液酸
N-Acetyl Neuraminic Acid/NANA/Neu5Ac/SA 质量规格：度≥98.0% CASPASE-2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
红霉素
Erythromycin 质量规格：≥850 μg/mg,BR
Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA试剂盒小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
红霉素(标准品) Erythromycin 质量规格：标准品用于含量测定 小鼠热休克蛋白20(Hsp-20)ELISA试剂盒 ，英文名： Hsp-20 ELISA Kit
盐酸多巴酚丁胺
Dobutamine HCL 质量规格：BR，细胞培养级，度大于99%，USP29 小鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA检测试剂盒Mouseplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit
96T/48T
羟丙基β环糊精;2-羟丙基-β-环糊精
HPCD 质量规格：>98%,药用级 人钙结合蛋白S100A14 试剂盒 Human
S100A14 ELISA Kit
羧甲基壳聚糖
Carboxymethyl chitosan 质量规格：羧基化度80%,粘度10mPa.s~80mpa.s(cps);氧羧甲基 Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒规格：96T/48T
依诺肝素钠
Enoxaparin 质量规格：BR，细胞培养级；Anti-factor Xa activity(dried substance)：90.0~125.0IU/mg；Anti-factor Ⅱa
activity(dried substance) ：20.0~35.0IU/mg。符合USP35标准 CASPASE-2蛋白共沉淀分析试剂盒5
依诺肝素钠(标准品) Enoxaparin 质量规格：效价测定 MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISA试剂盒小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
马来酸曲美布汀（标准品） Trimebutine maleate 质量规格：含量测定 小鼠染色质装配因子1亚基B(CHAF1B)ELISA试剂盒 ，英文名： CHAF1B ELISA Kit人网状蛋白4(RTN4)酶联吸附测定试剂盒 别称:ASY,Foocen,Human NogoA,My043 protein,Nbla00271,Nbla10545,neurite growth inhibitor 220,Neurite outgrowth inhibitor,Neuroendocrine-specific protein,Neuroendocrine-specific protein C homolog,NI220/250,Nogo A,NOGO,Nogo protein,NOGO-A,
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞产品仅用于科研
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
D6D；杂交瘤细胞应用的学科领域较为宽广，如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。