ELISA包被抗原過程
日期:2025-01-21 22:55
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摘要:
ELISA包被抗原過程:
1. 用 50mM 的碳酸鹽包被緩沖液(pH 9.6)溶解抗原,使抗原濃度為 10-20 μg/ ml, 加 100 μl/孔到 96 孔酶標(biāo)板, 4 oC 放置過夜。
2. 第2天棄
去包被液后, 用 PBST 洗滌 3 次,每孔加入 150 μl 1% BSA 37 oC
封閉 1 小時(shí)。
3. PBST 洗滌 3 次后,每孔加入 100 μl 不同倍比稀釋度的血清,并加入對(duì)照樣
品, 37 oC 孵育 2 小時(shí)。
4. PBST 洗滌 5 次后,加入 100μl 稀釋后的 HRP 標(biāo)記的二抗,37 oC 孵育 1 小時(shí)。
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ELISA包被抗原過程:
1. 用 50mM 的碳酸鹽包被緩沖液(pH 9.6)溶解抗原,使抗原濃度為 10-20 μg/ ml, 加 100 μl/孔到 96 孔酶標(biāo)板, 4 oC 放置過夜。
2. 第2天棄
去包被液后, 用 PBST 洗滌 3 次,每孔加入 150 μl 1% BSA 37 oC
封閉 1 小時(shí)。
3. PBST 洗滌 3 次后,每孔加入 100 μl 不同倍比稀釋度的血清,并加入對(duì)照樣
品, 37 oC 孵育 2 小時(shí)。
4. PBST 洗滌 5 次后,加入 100μl 稀釋后的 HRP 標(biāo)記的二抗,37 oC 孵育 1 小時(shí)。
5. PBST 洗滌 5 次后,顯色劑顯色 20min 后,酶標(biāo)儀上讀取 A405 吸收值。