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ELISA測定中出現(xiàn)問題的可能的四個原因

日期:2025-01-23 05:59
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摘要: ELISA測定中出現(xiàn)問題的可能原因(非試劑盒本身的原因),總結(jié)如下: 1、弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出溫育的時間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題。 2、測定的重復(fù)性差,這是由于測定操作引起的問題,包括 ①加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致 ②加樣過快,孔間發(fā)生污染 ③加錯樣本 ④加樣本及試劑時,加在孔壁 ⑤不同批號試劑盒中組分混用 ⑥溫育時間、洗板、顯色時...

ELISA測定中出現(xiàn)問題的可能原因(非試劑盒本身的原因),總結(jié)如下:


1、弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出溫育的時間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題。


2、測定的重復(fù)性差,這是由于測定操作引起的問題,包括


①加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致


②加樣過快,孔間發(fā)生污染


③加錯樣本


④加樣本及試劑時,加在孔壁


⑤不同批號試劑盒中組分混用


⑥溫育時間、洗板、顯色時間不一致


⑦孔內(nèi)污染雜物,


血清標(biāo)本未完全凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽性等。


3、全部孔都不顯色


①漏加酶結(jié)合物;


②洗板液配制中出現(xiàn)問題


③漏加顯色劑A或B


④終止劑當(dāng)顯色劑使用


4、全部板孔均有顯色


①板不干凈


②顯色液變質(zhì)


③洗板液受酶等污染