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流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)步驟

日期:2025-01-21 23:07
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摘要: 流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn): 1、制備細(xì)胞懸液,計數(shù) 2、分裝,按照每個EP(1.5ml)管1-2*10 6個細(xì)胞分裝,3500rpm,4度離心。 3、用100ulPBS重懸,加入10ul大鼠血清封閉,4度避光30min。 4、加入相應(yīng)的熒光標(biāo)記的抗體,混勻,避光,4度孵育30min。 5、加入1mlPBS洗兩遍。 6、用200ul PBS重懸,經(jīng)紗布過濾轉(zhuǎn)至流式管,上級檢測。 溫馨提示:細(xì)胞或者大小接近的顆...

流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn):


1、制備細(xì)胞懸液,計數(shù)


2、分裝,按照每個EP(1.5ml)管1-2*10 6個細(xì)胞分裝,3500rpm,4度離心。


3、用100ulPBS重懸,加入10ul大鼠血清封閉,4度避光30min。


4、加入相應(yīng)的熒光標(biāo)記的抗體,混勻,避光,4度孵育30min。


5、加入1mlPBS洗兩遍。


6、用200ul PBS重懸,經(jīng)紗布過濾轉(zhuǎn)至流式管,上級檢測。


溫馨提示:細(xì)胞或者大小接近的顆粒物質(zhì)都可以檢測。


樣本通過鞘液的輸送,成單個隊(duì)列依次通過激光束。樣本事先可以根據(jù)檢測需要被熒光標(biāo)記,通過激光束的時候就會得到熒光信號,被記錄下來。可以同時標(biāo)記不同的熒光標(biāo)記做不同的檢查。優(yōu)點(diǎn)就是可以在短時間內(nèi)檢測大量的樣本(每秒幾千個到幾萬個細(xì)胞)。


主要應(yīng)用于各種生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷。國際上通用的白細(xì)胞和淋ba瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)就是靠流式細(xì)胞儀的分型來確定的。