實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.產(chǎn)品名稱本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
RWPE-2 細(xì)胞 |
詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
BJ-99438 |
服務(wù)描述:
公司提供委托細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù),細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:
客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、公司科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:
客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研。
運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
鈣ATP酶SERCA蛋白共沉淀分析試劑盒5 銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L
HNO3) Copper solution 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3
ELISAKitADRP人脂肪分化相關(guān)蛋白規(guī)格:48T/96T 銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:1%HNO3) Copper solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:1%HNO3
小鼠0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒 ,英文名: PCK ELISA Kit 鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Cobalt standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
大鼠促生長(zhǎng)釋放(GRH)ELISA檢測(cè)試劑盒ratgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit 96T/48T 六價(jià)鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水) Chromium Standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水
人凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4(Casp4)試劑盒 human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA Kit 鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3) Erbium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3
RatNervegrowthfactor,NGFELISAKit大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 金標(biāo)準(zhǔn)溶液(100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液) Gold solution 質(zhì)量規(guī)格:100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液
EB病毒DNA化試劑盒20 銥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基質(zhì):2.0mol/L鹽酸) Iridium standard solution 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基質(zhì):2.0mol/L鹽酸
Mousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISA試劑盒小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:1%硝酸) Nickel standard 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%硝酸
小鼠0酸酶張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒 ,英文名: PTEN ELISA Kit 鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:1%HCl) Potassium standard 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:1%HCl
人細(xì)胞角蛋白19(CK-19)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancytokeratin19,CK-19ELISAKit
96T/48T 鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCl) Praseodymium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,基體:10%HCl
1955/6/1
3,3’,5-Triiodo-L-thyronine (sodium salt) 1g
SARS-CoV-2(新冠病毒)Orf1ab基因染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度
1955/6/1 3,3’,5-Triiodo-L-thyronine (sodium salt) 250mg SARS-CoV-2(新冠病毒)Orf1ab基因RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度
1955/6/1 3,3’,5-Triiodo-L-thyronine (sodium salt) 500mg SARS-CoV-2(新冠病毒)Orf1ab基因RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度
1955/6/1 Liothyronine Sodium 50mg Xinjiang Hemorrhagic Fever Virus(XHFV)新疆出血熱病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
1956/12/2 γ-Aminobutyric acid 100mg
Novel Bunyavirus新型布尼亞病毒探針?lè)晒舛?span>RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度
HSC-T6:大鼠肝星形細(xì)胞保存 規(guī)格T25m2
HSFb:RWPE-2 細(xì)胞增生性瘢痕成纖維細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 規(guī)格T25m2
HT1080:成纖維肉瘤細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 規(guī)格T25m2
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。